Analisis PCR untuk hepatitis C

Hepatitis C virus adalah salah satu penyakit yang paling berbahaya dan sukar didiagnosis. Masalahnya ialah selalunya penyakit ini dikesan hanya pada peringkat kemudian kerana fakta bahawa bentuk utamanya adalah kronik, dan CHC tidak simptomatik. Walau bagaimanapun, diagnosis awal membolehkan anda memilih rawatan yang paling tepat yang akan membantu anda melupakan radang hati virus selama-lamanya..

Salah satu kaedah yang paling serba boleh untuk menentukan HCV adalah tindak balas rantai polimerase (PCR). Tetapi apakah analisis PCR untuk hepatitis C? Apakah ciri-ciri ujian ini? Bagaimana analisis PCR untuk hepatitis C berbeza secara kualitatif dari kuantitatif? Bagaimana keputusan ujian diuraikan? Anda boleh mendapatkan jawapan untuk setiap soalan ini dalam artikel kami..

Diagnosis HCV oleh PCR

Tindak balas rantai polimerase adalah salah satu kaedah yang paling biasa dan tepat untuk mendiagnosis HCV. Tetapi apa yang ditunjukkan oleh ujian PCR untuk hepatitis C? Hasil ujian memungkinkan untuk menentukan kehadiran flavavirus di dalam badan inang, serta tahap viral load di dalam tubuhnya..

Sampel darah vena pesakit yang diambil pada hari kajian digunakan untuk analisis. Mengambil ujian PCR untuk hepatitis C disyorkan untuk kategori orang berikut:

  • Pesakit dengan imunoglobulin yang dikesan kepada antigen agen penyebab HCV
  • Bagi wanita semasa mengandung
  • Pekerja perubatan yang selalu bersentuhan dengan cecair badan yang dijangkiti
  • Pesakit dengan sejarah hepatitis virus yang disembuhkan sebelumnya
  • Pesakit dengan gejala kerosakan hati yang jelas

Ujian hepatitis C PCR boleh berbentuk kualitatif atau kuantitatif. Kedua-dua kaedah tersebut digunakan secara aktif dalam diagnosis HCV. Mari kita pertimbangkan dengan lebih terperinci mengenai ciri-ciri analisis PCR kualitatif dan kuantitatif untuk hepatitis C.

Ujian kualitatif

Reaksi kualitatif dilakukan sekiranya diagnosis HCV yang telah ditetapkan sebelumnya memerlukan pengesahan. Hasil ujian boleh positif dan negatif. Reaksi positif menunjukkan adanya agen berjangkit di badan subjek. Sebaliknya, hasil negatif menunjukkan sama ada ketiadaan patogen, atau kepekatannya yang tidak signifikan..

Apakah PCR untuk hepatitis (jenis kualitatif)? Ujian ini membantu menentukan diagnosis secara pasti. Kos pelaksanaannya di Moscow, bergantung pada klinik, berbeza dari 1800 hingga 3000 rubel.

Tindak balas kuantitatif

Darah untuk tindak balas rantai polimerase kuantitatif didermakan jika diagnosis telah dibuat. Analisis ini membolehkan anda menentukan beban patogen pada tubuh pesakit pada masa ini. Oleh itu, doktor yang hadir menerima maklumat mengenai kawasan hati yang terkena flavavirus dan dapat memilih rejimen terapi yang diperlukan dalam kes tertentu..

Semakin tinggi parameter patogen dalam darah pesakit, tahap penyakit ini akan semakin serius. Kos tindak balas rantai polimerase kuantitatif di klinik Moscow berkisar antara 1.800 hingga 4.000 rubel, bergantung pada pilihan kemudahan perubatan.

Bersedia untuk Ujian PCR Hepatitis C

Jadi, jawapan kepada soalan "Apakah analisis PCR untuk hepatitis C?" dijumpai. Tetapi bagaimana anda membuat persediaan untuk diagnosis yang akan datang? Semasa bersiap untuk menderma sampel darah untuk ujian PCR hepatitis C, pesakit harus:

  • Beberapa hari sebelum tiba di makmal, meninggalkan makanan segera dan makanan berat dan berlemak yang lain
  • Dalam 24 jam sebelum mengambil ujian PCR untuk hepatitis C, jangan minum alkohol dan jangan merokok
  • Jangan makan selama 8 jam sebelum diagnosis
  • Untuk keselamatan anda sendiri, sebelum memasukkan jarum suntikan ke dalam vena, pastikan bahawa pekerja kesihatan hanya menggunakan jarum suntik sekali pakai

Darah yang sangat sedikit diambil untuk tindak balas rantai polimerase. Oleh itu, selepas prosedur, pesakit tidak memerlukan pemulihan. Oleh itu, sebaik sahaja selesai prosedur, pesakit pulang ke rumah. Diagnostik dijalankan pada waktu pagi.

Analisis penyahkodan PCR

Penyahkodan ujian PCR untuk hepatitis C dilakukan di makmal perubatan. Kesalahan dalam hasil akhir bergantung pada kompetensi pekerja kesihatan, dan juga bagaimana subjek mengikuti peraturan persiapan ujian.

Sekiranya analisis PCR kualitatif untuk hepatitis C, penting untuk mempertimbangkan ambang kepekaan reagen, yang berfluktuasi antara 10-500 IU / ml. Reaksi rantai polimerase berkualiti tinggi hanya boleh mempunyai 2 hasil:

  • Positif. Diagnosis hepatitis C virus disahkan dengan pengesanan flavavirus dalam darah pesakit. Kepekatan patogen dalam plasma darah cukup untuk membuat diagnosis. Sekiranya diagnosis dilakukan setelah rawatan, hasilnya menunjukkan ketidakefektifan terapi..
  • Negatif. Patogen tidak ada, atau kepekatannya dalam darah sangat rendah. Hasil seperti itu tidak selalu menunjukkan ketiadaan jangkitan. Pemeriksa disyorkan untuk lulus ujian tambahan untuk kepekaan terhadap reagen.

Untuk mengetahui apa yang ditunjukkan oleh analisis PCR untuk hepatitis C dalam ujian kuantitatif, anda perlu bermula dari penunjuk tengah sama dengan 8x10 ^ 5 IU / ml (800,000 IU / ml).

Sekiranya tahap beban patogen di bawah atau sama dengan purata, pesakit diberi terapi ubat berdasarkan ubat tindakan antivirus langsung. Sekiranya jumlahnya melebihi 800,000 unit, doktor yang hadir perlu memikirkan langkah-langkah yang lebih serius untuk memerangi HCV. Pesakit mungkin memerlukan pemindahan hati.

Penentuan hepatitis C virus oleh PCR dilakukan di banyak institusi perubatan di ibu negara. Pada masa yang sama, pengujian dapat dilakukan baik dalam keadaan pesakit dalam maupun pesakit luar..

Analisis PCR untuk hepatitis C: di mana dan bagaimana menyebarkannya dengan betul, yang bermaksud hasil positif dan negatif

PCR untuk hepatitis C adalah analisis wajib ketika memeriksa pesakit dengan gejala kerosakan hati. Kajian ini ditetapkan untuk mengesahkan diagnosis dan mendapatkan maklumat yang paling lengkap mengenai agen penyebab penyakit ini, iaitu aktiviti jangkitan virus. Hasilnya berfungsi sebagai asas untuk menetapkan terapi antivirus, menentukan lamanya dan menilai keberkesanannya..

Diagnostik menggunakan teknik tindak balas rantai polimerase semakin meluas sejak kebelakangan ini. Penyelidikan mengenai topik ini telah dilakukan sejak pertengahan tahun 1970-an. Tetapi penerbitan pertama mengenai kemungkinan menggunakan PCR dalam perubatan praktikal hanya muncul pada pertengahan 1980-an..

  • Jenis PCR
  • Petunjuk untuk ujian
  • Di mana hendak diambil?
  • Peraturan menderma darah
  • Penyahkodan hasilnya
  • Kelebihan diagnostik PCR
  • Kos

Semasa menerangkan apa itu PCR, doktor menekankan bahawa ini adalah analisis yang paling dipercayai dan boleh dipercayai untuk hepatitis C. Ujian ini bukan sahaja dapat mengenal pasti zarah RNA virus, tetapi juga untuk menentukan kepekatannya (menunjukkan aktiviti proses berjangkit) dan genotip. Hasil yang diperoleh memainkan peranan penting dalam menentukan taktik dan skema terapi lanjutan..

Apakah intipati tahap reaksi? Dengan bantuan bahan aktif biologi tertentu, peningkatan jumlah zarah RNA virus dalam jumlah darah yang kecil dapat dicapai. Selepas itu, bahagian genom ditentukan oleh pelbagai kaedah fizikokimia.

PCR dilakukan dengan menggunakan beberapa komponen:

  • Primer. Ini adalah sebatian buatan yang disintesis di mana urutan nukleotida sama persis dengan kawasan tertentu RNA virus, yang tidak mengalami mutasi dan perubahan bergantung pada genotip. Penentuan RNA virus hepatitis C dilakukan dengan menggunakan primer khusus yang ketat.
  • RNA polimerase. Enzim yang dicirikan oleh kestabilan dan kestabilan struktur dengan latar belakang perubahan suhu yang diperlukan untuk tindak balas kimia yang betul. Menyediakan pembinaan rantai RNA pada salah satu peringkat PCR.
  • Campuran Protein. Untuk membina bahagian tambahan RNA, "bahan binaan" diperlukan, yang mana sebatian struktur protein tertentu ditambahkan ke sampel biologi.
  • Penyangga. Campuran yang mengekalkan tahap pH optimum untuk tindak balas rantai polimerase.
  • Sampel bahan biologi yang disyaki mengandungi sampel RNA HCV (Hepatitis C Virus).

Dalam beberapa kaedah pementasan PCR, probe RNA dan kawalan dalaman lain juga digunakan, yang digunakan sebagai sampel kawalan ketika mengenal pasti hasil.

Proses penambahan kawasan RNA virus menggunakan matriks disebut penguat. Reaksi berlangsung dalam beberapa peringkat:

  1. Penolakan. Proses "melepaskan" helai RNA disediakan dengan menaikkan suhu ke tahap tertentu.
  2. Meluruskan. Setelah menurunkan suhu ke nilai yang diperlukan, primer melekat pada RNA. Tahap ini mungkin hanya jika zarah virus yang diinginkan terdapat dalam sampel darah..
  3. Sintesis langsung kawasan RNA virus dengan penyertaan enzim.

Kitaran pementasan PCR yang disenaraikan diulang beberapa kali ganda, yang memberikan peningkatan yang berlipat ganda dalam jumlah kawasan RNA patogen hepatitis C tahap yang ditentukan oleh kaedah makmal.

Sampel darah disediakan dengan betul sebelum melakukan ujian. RNA yang terkandung diserap ke dalam penyangga pembawa, kemudian dibasuh dan digunakan untuk memulai reaksi berantai polimerase.

Hasilnya dikesan sama ada dengan elektroforesis (mendatar atau menegak) atau dengan hibridisasi. Kaedah untuk menyahkod hasil reaksi dipilih berdasarkan objektif kajian (hanya mengenal pasti RNA, atau menentukan jumlah anggarannya).

PCR - ujian darah yang paling tepat untuk hepatitis C

Senarai kajian yang dicadangkan untuk NKT merangkumi beberapa perkara yang berbeza dari segi kos, masa kesediaan dan kaedah pelaksanaan..

Sekiranya kita merujuk kepada protokol Pertubuhan Kesihatan Sedunia (WHO), prosedur untuk mendiagnosis jangkitan merangkumi beberapa peringkat berurutan..

Sebagai permulaan, mereka menyewa:

  • analisis umum darah dan air kencing;
  • biokimia darah;
  • kajian untuk kandungan glukosa (ketat semasa perut kosong);
  • Ujian HIV;
  • fluorografi;
  • imunogram (jika anda mengesyaki adanya patologi autoimun).

Sekiranya parameter ujian darah biokimia menyimpang dari norma fisiologi, pesakit diberi ujian berdasarkan pengesanan antibodi spesifik yang dihasilkan oleh kontak virus dengan darah (ELISA).

Tetapi ujian darah untuk hepatitis C mempunyai kelemahan yang ketara. Proses sintesis antibodi bergantung pada fungsi dan pengeluaran sel-sel imunokompeten. Ciri-ciri individu badan boleh menyebabkan tindak balas positif negatif dan palsu yang salah..

Sebelum menetapkan ujian ELISA, doktor memberitahu pesakit tentang kemungkinan kesalahan, yang menimbulkan pertanyaan: "Ujian darah mana yang menunjukkan hepatitis C dengan risiko minimum untuk mendapatkan hasil yang salah?" Untuk mengesahkan atau membantah diagnosis, ujian makmal yang paling tepat adalah PCR masa nyata.

Taktik tindakan selanjutnya bergantung pada apa yang ditunjukkan oleh penyelidikan. Sekiranya diagnosis disahkan, pesakit segera diresepkan hepatoprotectors, diberi amaran mengenai pentingnya pemakanan yang betul dan gaya hidup yang sihat. Tetapi terapi yang disasarkan adalah mustahil tanpa menentukan tahap genotip viral load dan hepatitis C..

Sebilangan ubat boleh menimbulkan peningkatan hepatitis B. Oleh itu, untuk mengecualikan komplikasi, ujian untuk HBsAg juga ditetapkan. HCV dirawat hanya setelah keputusan ujian negatif.

Spesies: Kualitatif, Kuantitatif dan Genotaip

Dalam diagnosis awal hepatitis C, titer antibodi yang dihasilkan ditentukan oleh kaedah serologi. Hasil ini menunjukkan secara kasar aktiviti proses patologi. Tetapi doktor boleh mendapatkan maklumat yang paling tepat hanya setelah mengkaji data PCR.

Pada masa ini, di hampir semua makmal, analisis dilakukan menggunakan kaedah ultrasensitif. Oleh itu, diagnosis HCV adalah mungkin dalam 10-14 hari selepas jangkitan, lebih jarang - selepas 2.5-3 minggu. Bergantung pada tujuan yang dicapai semasa kajian, doktor menetapkan jenis ujian tertentu.

Terdapat jenis PCR berikut:

  1. Kualitatif. Semasa menetapkan ujian diagnostik, pesakit mempunyai persoalan mengenai apa yang ditunjukkan oleh kaedah penyelidikan ini. Analisis kualitatif dengan kaedah PCR adalah ujian yang sangat sensitif yang menentukan kehadiran RNA virus dalam darah pada kepekatan minimum. Biasanya, tindak balas rantai polimerase seperti ini dilakukan dengan menggunakan teknologi transkripsi terbalik. Ini adalah salah satu daripada beberapa kaedah PCR di mana RNA dapat digunakan sebagai sasaran.
  2. Kuantitatif. Pengukuran hepatitis C membolehkan anda menentukan tahap tepat RNA HCV dalam darah anda. Penyelidikan boleh dilakukan hanya dengan satu cara - kaedah masa nyata. Dalam proses penyediaan bahan untuk PCR, pewarna ditambahkan ke sampel. Selepas setiap kitaran penguat, kajian kuantitatif automatik masa nyata dilakukan. Teknik ini sering dilakukan bersama dengan transkripsi terbalik. Oleh itu, adalah mungkin secara kualitatif menentukan sebilangan kecil salinan RNA virus. Adalah masuk akal untuk menentukan tahap RNA HCV secara kuantitatif jika hasil positif PCR kualitatif diperoleh..
  3. Genotip. Analisis dilakukan pada peringkat akhir proses diagnostik. Prinsip kajian berdasarkan perbezaan urutan nukleotida, yang membezakan satu genotip virus hepatitis C dari yang lain. Biasanya analisis dilakukan dengan multi-primer (multiplex) PCR.

Sekiranya anda mengesyaki terdapat virus, anda perlu melakukan PCR berkualiti tinggi. Sekiranya hasilnya negatif, kemungkinan besar orang itu sihat. Tetapi untuk mengecualikan jangkitan sepenuhnya, disarankan untuk mengulangi kajian ini setelah 7-10 hari. Sekiranya RNA virus dikesan, ujian lebih lanjut dilakukan (kuantitatif dan genotip).

Petunjuk untuk ujian makmal

Petunjuk utama untuk menderma darah untuk hepatitis C dengan kaedah tindak balas rantai polimerase adalah imunoassay enzim positif (tanpa mengira jenisnya: Ujian total, pembezaan untuk IgG dan IgM).

Di samping itu, anda perlu memeriksa:

  • semasa kehamilan (ujian dilakukan dua kali - pada trimester pertama dan 7-10 minggu sebelum kelahiran);
  • semasa bekerja dengan peningkatan risiko jangkitan (jururawat, pembantu makmal, pekerja pusat penderma, pakar kosmetik, dll.);
  • dengan hubungan seksual yang tidak kemas dan hubungan tanpa perlindungan dengan orang yang tidak dikenali;
  • dengan latar belakang HIV, barah, mengambil ubat-ubatan tertentu, dan lain-lain;
  • pesakit ketagihan ubat intravena;
  • dengan pelaksanaan prosedur diagnostik atau terapi invasif yang berterusan;
  • dengan pemindahan darah dilakukan sebelum tahun 1992 (sebelumnya tidak ada cara yang boleh dipercayai untuk memeriksa bahan biologi penderma untuk kehadiran virus).
  • apabila luka terbuka bersentuhan dengan darah orang lain, alat perubatan yang tidak disterilkan.

Kejadian itu meningkat setiap tahun. Oleh itu, untuk pengesanan awal jangkitan, ujian makmal untuk HCV disarankan untuk dilakukan sekali dalam setahun..

Di mana hendak diuji

Semasa menghubungi klinik, pesakit berhak mendapat ujian percuma. Tetapi pertama-tama mereka mengambil ujian ELISA. Dan hanya dengan hasil positif atau ragu, kajian PCR ditunjukkan. Oleh itu, diagnosis mendesak dapat dibuat dengan menghubungi makmal berbayar, di mana anda boleh menderma darah untuk PCR pada waktu yang sesuai untuk pesakit. Pada masa yang sama, disarankan untuk segera memeriksa petunjuk enzim hati, parameter darah klinikal standard.

Sebagai peraturan, kajian mengenai darah oleh PCR terdapat di hampir semua makmal. Sekiranya pusat pengumpulan darah tidak dilengkapi dengan peralatan yang sesuai, bahan biologi diangkut untuk penyelidikan sesuai dengan rejim suhu dan keadaan lain. PCR di klinik hanya mungkin dilakukan setelah pemeriksaan lain, hasilnya secara tidak langsung menunjukkan adanya hepatitis C.

Cara menderma darah dengan betul

Sebelum menderma darah untuk mengesan kemungkinan virus, anda harus mengikuti beberapa peraturan untuk mempersiapkan analisis..

Aspek utama ditunjukkan dalam memo:

  1. Selama 5-7 hari, hentikan pengambilan makanan berlemak, goreng, alkohol. Secara umum, doktor mengesyorkan mematuhi peraturan pemakanan untuk diet nombor 5.
  2. Jangan makan 12-14 jam sebelum kajian. Anda hanya boleh minum air.
  3. Lebih baik menderma darah pada waktu pagi..
  4. Jangan merokok sebelum prosedur.

Anda juga harus memberi amaran kepada doktor mengenai ubat-ubatan yang diambil, kemungkinan masalah kesihatan, penyakit kronik..

Darah diambil dari urat. Setelah tamat prosedur, jururawat menutup tempat tusukan dengan plaster steril, memberi amaran mengenai perlunya membengkokkan lengan dan menahannya dalam kedudukan ini selama 10-15 minit. Jika tidak, kemungkinan hematoma menyakitkan adalah tinggi..

Berapa lama masa kajian ini dijalankan?

Berapa banyak analisis yang dilakukan bergantung kepada makmal. Masa petunjuk purata berkisar antara 1-3 hari. Beberapa klinik menyediakan perkhidmatan berbayar untuk ujian PCR yang cepat, namun waktunya dibatasi oleh kemampuan peralatan perubatan..

Di klinik, hasilnya boleh dihantar kepada doktor dalam masa 7-10 hari. Ini dikaitkan dengan kemasukan pesakit yang banyak. Pada masa yang sama, bahan biologi disimpan sesuai dengan semua keperluan.

Penyahkodan hasilnya

Sebagai peraturan, penyahkodan PCR berkualiti tinggi tidak sukar. Tetapi untuk mengelakkan salah tafsir, anda harus berjumpa doktor dengan borang yang diterima dari makmal. Pilihan, yang bermaksud ini atau jenis PCR, ditunjukkan dalam jadual.

Negatif: orang itu sihat atau kepekatan RNA virus dalam darah terlalu rendah untuk dikesan.

Positif: orang itu dijangkiti

Dilakukan sekiranya RNA virus dikesan dengan kaedah penyelidikan kualitatif.

Bergantung pada keputusan ujian yang diperoleh, tahap viral load ditentukan

Dilakukan dengan hepatitis C, disahkan oleh kaedah penyelidikan lain.

Analisis ini membolehkan anda menentukan genotip patogen patologi yang tepat

Tetapi sering timbul situasi apabila ELISA untuk hepatitis C positif, dan PCR negatif. Hanya doktor yang dapat menguraikan keputusan ujian tersebut..

Walau bagaimanapun, data tersebut mungkin berlaku dalam kes berikut:

  • kehamilan;
  • dipindahkan dalam bentuk akut hepatitis C;
  • Rawatan HCV selesai;
  • kehadiran jangkitan yang meningkatkan kemungkinan hasil ELISA positif palsu.

Hanya tindak balas rantai polimerase yang menunjukkan adanya jangkitan virus yang tepat di dalam badan. Dengan latar belakang PCR negatif, ELISA positif dalam kebanyakan kes menunjukkan bahawa orang tersebut tidak dijangkiti. Tetapi doktor harus menentukan punca sebenar hasil positif palsu..

Analisis kualitatif

Analisis PCR kualitatif untuk hepatitis C mengesahkan adanya patogen dalam darah. Sekiranya RNA virus tidak dikesan, orang itu sihat. Tetapi jika disyaki ada jangkitan, disarankan untuk menjalani kajian semula. Hasil positif menunjukkan jangkitan. Tetapi analisis ini tidak membenarkan membezakan hepatitis C kronik dari akut, dan tidak dapat menunjukkan seberapa aktif proses patologi..

Ujian kuantitatif

Analisis kuantitatif oleh PCR dilakukan setelah pengesahan diagnosis dan penyahkodannya penting untuk menentukan taktik rawatan. Bergantung pada kepekatan zarah agen penyebab hepatitis C, beberapa darjah viral load dibezakan: sederhana, tinggi dan rendah. Semakin tinggi indikatornya, semakin teruk jangkitannya dan semakin sukar terapi ini. Biasanya, RNA virus tidak ada dalam darah.

Genotip

Banyak makmal melakukan genotip bersamaan dengan PCR kuantitatif, yang menjimatkan wang. Kajian semacam itu dilakukan hanya sekali, sebelum memulakan rawatan. Biasanya, analisis dilakukan untuk salah satu daripada empat genotip yang paling biasa (1, 2, 3, atau 4). Subjenis HCV ditentukan pada masa yang sama. Genotip untuk subspesies 5 dan 6 hepatitis C tidak mungkin dilakukan di setiap makmal.

Kelebihan diagnostik PCR

Diagnostik dengan kaedah PCR semakin meluas kerana:

  • ketepatan tinggi (dengan syarat sistem ujian generasi terkini digunakan);
  • kemudahan pensampelan biomaterial;
  • keputusan pantas (maksimum 5 hari).

Tetapi kelebihan utamanya terletak pada kemampuan diagnostik kajian yang luas. Analisis ini memungkinkan bukan hanya untuk mengenal pasti virus, tetapi juga untuk menentukan kepekatannya secara tepat di dalam tubuh dan menentukan genotip jangkitan. Di samping itu, penyelidikan kuantitatif diperlukan untuk menilai keberkesanan terapi antivirus. Matlamat utama rawatan adalah untuk mencapai kadar ujian (iaitu tahap HCV RNA yang tidak dapat dikesan) pada 4, 12 atau 24 minggu kursus antivirus dan mengekalkan hasil ini.

Kos

Kos analisis PCR berbeza mengikut wilayah. Jadi, di Moscow harganya lebih tinggi. PCR berkualiti tinggi akan menelan belanja 600-800 rubel, kuantitatif - 2200-3000 rubel, genotip - dari 1000 rubel. Anda dapat mengetahui dengan tepat berapa kos kajian khusus secara langsung di makmal, di laman web organisasi perubatan atau melalui telefon.

Analisis kualitatif untuk hepatitis C: transkrip

Penyebab perkembangan hepatitis C virus adalah jangkitan dengan patogen yang tergolong dalam keluarga Flaviviridae. Selang waktu yang lama dikesan antara jangkitan dan permulaan penghasilan antibodi, yang tidak memungkinkan diagnosis penyakit tepat pada masanya melalui enzim.

Analisis PCR untuk hepatitis C, biokimia, CBC, ujian hati dilakukan jika disyaki ada jangkitan. Dengan reaksi berantai polimerase, virus dapat dikesan dalam darah bahkan pada minggu pertama jangkitan, yang merupakan kelebihan kaedah ini.

Analisis kuantitatif dan kualitatif untuk hepatitis C dan ciri-ciri kajian, bagaimana menyediakan, sama ada terdapat kesilapan, penyahkodan - kita akan mempertimbangkan secara terperinci.

Apakah kaedah tindak balas rantai polimerase?

Reaksi rantai polimerase adalah teknik penyelidikan molekul untuk menentukan bahan genetik agen virus dari hari-hari pertama jangkitan. Analisis dicirikan oleh tahap kebolehpercayaan, kekhususan, dan ketepatan yang tinggi. Terima kasih kepadanya, tidak hanya ketiadaan / kehadiran virus yang dikesan, tetapi juga viral load (nilai kuantitatif), genotip.

Untuk kajian ini, darah pesakit diperlukan, di mana RNA jangkitan virus seharusnya berada. Dalam keadaan makmal, primer ditambahkan ke cecair biologi - ini adalah serpihan buatan sintesis gen yang dikehendaki dengan panjang pendek. Plus RNA polymerase - enzim khusus yang menggandakan kepekatan bahan yang diinginkan.

Selanjutnya, darah dengan penambahan komponen dipanaskan dan disejukkan beberapa kali dalam alat khas. Setelah itu dilakukan analisis hasil yang diperoleh, perbandingan dengan gen agen virus yang diketahui. Berdasarkan ini, kesimpulan dibuat mengenai penyakit ini.

Varieti penyelidikan PCR

Analisis untuk hepatitis C PCR dilakukan di makmal dengan penambahan reagen yang diperlukan, ia mempunyai tiga jenis dengan ciri khas:

  1. Analisis PCR kualitatif untuk hepatitis C adalah peringkat pertama kajian. Melaluinya, bahan genetik patogen dikesan dalam serum darah.
  2. Kajian kuantitatif membolehkan anda menganggarkan viral load - ini adalah kandungan bahan virus dalam 1 ml darah pesakit. Ia dilakukan sebelum memulakan perjalanan rawatan, dan kemudian setelah 1-4-12 minggu terapi. Apabila kursus ini panjang, kajian mesti dijalankan setelah 24 minggu terapi untuk menilai keberkesanannya.
  3. Genotip. Penyakit berjangkit berkembang dengan cepat, virus cenderung bermutasi. Oleh itu, perlu mengenal pasti genotip virus.

Para saintis telah mengenal pasti 7 genotip virus. Di Persekutuan Rusia, 1-2-3 spesies sangat biasa.

Setiap genotip dicirikan oleh ketahanan terhadap rawatan.

Sebagai contoh, dengan jenis 1, keberkesanan terapi adalah sekitar 60%, dengan latar belakang 2-3 jenis, penunjuk mencapai 85%.

Untuk mencari ubat yang tepat, jangka masa rawatan, diperlukan untuk mengenal pasti bukan hanya fakta jangkitan, tetapi juga kepekatan virus, genotipnya.

Petunjuk untuk

Penanda untuk hepatitis, PCR dan ELISA, ujian lain mempunyai petunjuk perubatan tertentu:

  • Apabila pesakit mempunyai sejarah jangkitan HIV, AIDS.
  • Hubungi dengan orang yang dijangkiti, kerana hepatitis virus sangat menular.
  • Gejala kerosakan hati sirosis - hepatomegali, peningkatan ukuran limpa, corak vena muncul di perut, dll..
  • Gambaran klinikal gangguan hati yang berfungsi - sakit berkala / berterusan di hipokondrium kanan, menguning kulit, mual.
  • Nilai tinggi AST dan ALT dalam biokimia darah.
  • Semasa mengandung, ketika ujian fungsi hati kurang baik.
  • Sebelum memulakan kursus antivirus untuk menentukan viral load.
  • Untuk memantau keberkesanan terapi.
  • Selepas terapi untuk mencegah berulang jangkitan virus.

PCR dilakukan dengan diagnosis hepatitis B yang disahkan untuk mengecualikan jenis kerosakan hati yang bercampur.

Persediaan untuk penyelidikan dan persampelan

Doktor akan memberitahu anda bagaimana untuk mempersiapkan analisis. Persiapan disyorkan kepada pesakit untuk mendapatkan hasil yang tepat. Ia terdiri daripada cadangan berikut:

  1. Analisis mesti dilakukan pada waktu pagi, semasa perut kosong. Hanya dibenarkan minum air bersih, tidak berkarbonat sebelum mengambil darah. Makanan terakhir - 8 jam sebelum pengambilan.
  2. Sekiranya anda tidak dapat menjalani ujian pada waktu pagi, anda boleh melakukannya pada waktu petang atau waktu makan tengah hari, yang paling penting - 5-6 jam selepas makan, tidak lebih awal.
  3. Berikan minuman beralkohol, minuman berkafein, jus 48 jam sebelum kajian.
  4. Selama 2 hari anda perlu mengikuti diet, tidak termasuk semua produk berbahaya. Walau bagaimanapun, sebilangan doktor percaya bahawa makanan berlemak dan goreng tidak mempengaruhi ketepatan ujian PCR..

Jangan minum ubat selama 24 jam sebelum manipulasi perubatan. Sekiranya ini tidak mungkin, maklumkan kepada doktor anda. Analisis tidak disarankan untuk dilakukan segera setelah ultrasound, CT, urut, dan prosedur fisioterapi lain.

Pensampelan darah berlaku seperti berikut:

  • Dengan menggunakan alat tunjuk khas yang diketatkan pada lengan bawah pesakit, doktor menghentikan aliran darah vena. Vena menjadi lebih kelihatan, yang memudahkan memasukkan jarum, kemudian mengambil darah.
  • Kawasan kulit sebelum penggunaan jarum steril dirawat dengan cecair yang mengandungi alkohol.
  • Jarum dimasukkan ke dalam vena, selepas itu tabung uji dilekatkan padanya, di mana darah mengalir.
  • Setelah pengenalan jarum, pucuk pucuk dikeluarkan. Kumpulkan jumlah darah yang diperlukan, keluarkan jarum.
  • Lapisan kapas yang dicelupkan dalam alkohol disapu ke tempat suntikan.

Untuk mengelakkan pembentukan lebam di tempat suntikan jarum, perlu menekan swab kapas cukup keras ke kawasan yang cedera, bengkokkan lengan dan tahan pada kedudukan ini selama 3-4 minit.

Sekiranya pesakit mengambil ubat yang menipiskan darah (Aspirin, Warfarin), mungkin ada masalah tertentu dengan menghentikan pendarahan.

Kelebihan PCR berbanding ujian lain

Kaedah tindak balas rantai polimerase mempunyai kelebihan tertentu berbanding teknik diagnostik lain..

Kelebihan kajian ditunjukkan dalam jadual:

Jenis kajianHasil yang mungkin dan transkrip yang dimaksudkan
PCR berkualiti tinggi
Kuantitatif
Genotip
Diagnosis langsung agen penyebab patologiKajian lain memungkinkan kita memberi jawapan - adakah patogen dalam badan atau tidak. Tetapi dengan menggunakan teknik PCR, anda secara khusus dapat menentukan jenis agen virus.
Kajian kekhususanPCR mengesan sekeping DNA yang unik yang hanya sesuai dengan satu jenis agen virus. Ini mengurangkan kemungkinan kesalahan..
Tahap kepekaan yang tinggiAdalah mungkin untuk mengesan walaupun terdapat sedikit kepekatan virus dalam darah.
Penentuan semua patogenSemasa penyelidikan, semua agen patogen dapat dikesan.
Jangkitan pendamSebagai tambahan kepada patogen virus, jangkitan dapat dikesan yang mempunyai jalan laten, dibezakan oleh aktiviti antigenik yang tinggi..

Apabila pesakit mendapat hasil positif, ini bermakna bahan genetik agen penyebab hepatitis telah dijumpai dalam cecair biologi. Jumlah negatif - tiada jejak virus.

Penyahkodan hasilnya

Doktor harus menguraikan keputusan berdasarkan kesimpulan yang pesakit terima di makmal. Adalah perlu untuk menganalisis data bersama dengan petunjuk biokimia, CBC, ultrasound.

Kualitatif

Kajian kualitatif akan menunjukkan adanya atau ketiadaan agen penyebab penyakit virus dalam darah manusia. Terdapat dua pilihan - negatif (norma) atau hasil positif.

Bentuk kadangkala tertulis: dijumpai atau tidak dijumpai.

Hasil positif - pembantu makmal mengenal pasti bahan genetik agen virus dalam darah pesakit, jangkitan disahkan. Kesimpulan negatif - tidak ada jangkitan, serpihan virus RNA berada di bawah had kepekaan.

Kuantitatif

Analisis kuantitatif menyiratkan beberapa pilihan untuk hasilnya. Untuk kemudahan, kami akan mempersembahkannya dalam bentuk jadual..

KeputusanPenyahkodan
NegatifInilah kebiasaan bagi orang yang sihat. Ini bermaksud bahawa tidak ada RNA hepatitis virus dalam bahan biologi yang dikaji, atau kandungannya kurang dari ambang kerentanan.
Hingga 1.8 * 10 ^ 2 IU / mlMenunjukkan bahawa kandungan RNA kurang daripada julat kuantifikasi. Hasil ini mesti ditafsirkan dengan teliti, kerana dianggap kontroversial. Selain itu, kajian lain sedang dilakukan untuk perbandingan seterusnya. Ulangi juga ujian PCR.
Hingga 8 * 10 ^ 5 IU / mlBeban viral rendah. Sebagai peraturan, hasil ini bermaksud bahawa rawatannya berkesan..
Dari 8 * 10 ^ 5 IU / mlBeban viral yang tinggi. Rawatan segera diperlukan (jika tidak dijalankan), atau pembetulan ubat diperlukan.
2.4 * 10 ^ 7 IU / mlRNA lebih besar daripada maksimum kuantifikasi atas. Terhadap latar belakang hasil seperti itu, viral load tidak dinilai. Diperlukan kajian kedua dengan pencairan sampel cecair biologi.

Genotip

Hasil - asid ribonukleik genotip tertentu dijumpai. Selain itu, genotip dan subjenis ditunjukkan, pembantu makmal membuat kesimpulan dalam huruf Latin dan angka. Contohnya, genotip 1a. Secara keseluruhan, 7 genotip, 67 subtipe dibezakan.

Hasil - RNA virus hepatitis C dikesan - ini adalah DNA genotip yang jarang dan tidak dapat dikaitkan dengan agen virus biasa, oleh itu, diperlukan diagnostik tambahan.

Apabila PCR negatif dan ELISA positif

Menentukan kesimpulan pembantu makmal hepatologi atau pakar penyakit berjangkit. Selalu ada risiko mendapat hasil negatif palsu atau positif palsu. Kadang-kadang berlaku bahawa PCR negatif, dan ELISA positif.

Ini bermaksud bahawa pada masa ini tidak ada virus dalam darah pasien, tetapi dia telah menderita penyakit akut. Secara umumnya dipercayai bahawa ELISA menunjukkan antibodi yang dihasilkan oleh sistem kekebalan tubuh setelah pencerobohan patogen ke dalam badan..

ELISA, dibandingkan dengan PCR, dicirikan oleh kebolehpercayaan dan kebolehpercayaan yang rendah, oleh itu ia digunakan sebagai penyaringan utama. Semasa mendiagnosis hepatitis virus, reaksi berantai polimerase sangat diperlukan.

Kos ujian untuk hepatitis C

Anda boleh mengambil ujian di hospital tempat pesakit diperhatikan, jika ada makmal di sana, atau menghubungi pusat swasta dengan bayaran.

Dalam masa yang singkat, anda boleh mendapatkan hasilnya di pusat makmal seperti Gemotest, Invitro, Helix.

Kos penyelidikan bergantung kepada makmal:

Nama perkhidmatan makmalDasar harga
Helix· Kos pensampelan bahan biologi - 170 rubel.

Penyelidikan kualitatif + kuantitatif dengan kaedah PCR - 3990 rubel.

Pengesanan antibodi penyakit virus - 1,500 rubel (2-3 hari).

Memeriksa aktiviti virus sebelum memulakan perjalanan terapi - 4090 rubel.

InvitroPengesanan kuantitatif RNA virus hepatitis C oleh PCR - 3140 rubel.

Pengumpulan bahan biologi (darah vena) - 199 rubel.

Penilaian viral load dengan pengesanan masa nyata - 18,000 rubel.

Ujian ultrasensitif berkualiti tinggi - dari 3000 rubel.

Genotip - dari 1250 rubel.

HemotestHarga penyelidikan kuantitatif 2200 rubel.

Diagnostik berkualiti tinggi dari 700 rubel.

Penentuan RNA patogen - dari 4000 rubel.

Persampelan darah dari urat sekitar 150 rubel.

Tempoh kajian adalah rata-rata 2-3 hari. Di beberapa makmal terdapat perkhidmatan analisis mendesak, harganya 1.5-2 kali lebih tinggi. Anda juga boleh menghubungi pakar perubatan di rumah untuk menderma darah, dan menerima hasilnya melalui e-mel atau secara langsung apabila anda menghubungi makmal..

Diagnostik PCR untuk hepatitis: cara menguraikan, jadual

Analisis PCR untuk hepatitis - apakah itu dan mengapa ia dilakukan

Inti dari analisis PCR adalah bahawa sebahagian daripada gen yang dipelajari terpaksa membiak dalam tabung uji menggunakan enzim dan keadaan khas. Analisis PCR untuk virus hepatitis membolehkan anda menentukan jenis virus, tanpa itu mustahil untuk menjalankan rawatan yang berkesan: setiap genotip berbeza dengan sensitif terhadap ubat antivirus.

Dua jenis PCR digunakan:

  • kualitatif;
  • kuantitatif.

Terapi antivirus memerlukan pemantauan berterusan untuk menyesuaikan rawatan tepat pada masanya; untuk tujuan ini, reaksi berantai polimerase juga digunakan.

PCR kualitatif dan kuantitatif

PCR kualitatif untuk hepatitis memberikan jawapannya: adakah ketegangan virus dalam darah pesakit dan yang mana. Genotip diperlukan untuk menjelaskan diagnosis, prognosis penyakit dan menentukan masa rawatan.

Apabila kehadiran virus disahkan, PCR kuantitatif untuk hepatitis dilakukan, dengan bantuan jumlah molekul RNA dalam sampel makmal pesakit dikira.

Persiapan untuk analisis PCR untuk hepatitis

Untuk analisis dengan kaedah tindak balas polimerase, diperlukan darah vena. Ini mesti dilakukan pada waktu pagi semasa perut kosong..

Pesakit harus bersiap sedia untuk menjalani kajian ini:

  • Selama 10 jam untuk menolak makanan, anda hanya boleh minum air bersih.
  • Berhenti minum alkohol sehari sebelumnya, jangan merokok selama 4 jam.
  • Tekanan fizikal dan emosi harus dielakkan sebelum pemeriksaan..
  • Selama 2 hari berhenti menggunakan ubat, jika ini tidak mungkin, maka perlu memberi amaran kepada pembantu makmal. Sebilangan ubat mempengaruhi hasil akhir.

Analisis PCR untuk hepatitis C

Sekiranya ujian PCR untuk hepatitis C memberikan hasil yang positif, ini menunjukkan bahawa mikroorganisma patogen terus membelah dan menjangkiti sel-sel hati.

PCR kuantitatif berikutnya untuk hepatitis C diukur dalam Unit Antarabangsa per 1 ml atau IU / ml, yang bermaksud berapa banyak salinan asid ribonukleik dari strain virus C tertentu yang terdapat dalam 1 ml darah ujian.

Jadual di bawah menunjukkan penyahkodan kajian kuantitatif untuk hepatitis C dengan kaedah PCR:

Beban virus, salinan / mlPenilaian bebanSifat replikasi patogen
103 dan kurangSangat rendahTidak aktif
104 - 105RendahLebih kerap tidak aktif
106SederhanaAktif
107BesarSangat aktif
  1. Beban virus yang rendah adalah isyarat bahawa rawatan terapi dipilih dengan betul, dan prognosis untuk menyembuhkan hepatitis C adalah baik.
  2. Kepekatan sel virus yang tinggi menunjukkan bahawa penyakit ini berada dalam fasa akut. Darah pesakit adalah sumber jangkitan yang berbahaya.
  3. Beban viral, yang indikatornya berada pada tahap rata-rata, mencirikan tahap kronik HVS, atau ia boleh mempunyai dua arah perkembangan: menuju peningkatan atau penurunannya.

Analisis kuantitatif PCR untuk hepatitis C dilakukan sepanjang keseluruhan terapi antivirus: setelah 4, 12 dan 24 minggu, tujuannya adalah untuk mengurangkan viral load.

Pada penghujungnya - selepas 6 bulan, PCR kawalan dilakukan.

Analisis PCR untuk hepatitis B

Analisis PCR untuk hepatitis B (B) dilakukan untuk mengesan jangkitan (DNA HBV).

Kepekatan DNA HBV diukur dalam bentuk salinan / ml atau saya / ml. Dalam menilai hasil kajian, mereka dipandu oleh petunjuk berikut:

  • 2x10 ^ 6 - dalam sembilan puluh lima peratus kes akan menjadi kronik.

Analisis penyahkodan PCR untuk hepatitis

Analisis PCR kualitatif mempunyai dua jawapan:

  1. negatif;
  2. positif.

PCR negatif bermaksud tidak terdapat patogen pada sampel darah.

Kebarangkalian kebolehpercayaan hasilnya adalah 95%. Selebihnya 5% adalah kesalahan manusia. Kemungkinan ini dibenarkan kerana syarat tinggi untuk kajian ini:

  • peraturan penyimpanan untuk reagen;
  • kelayakan kakitangan perubatan yang sesuai;
  • kesucian biomaterial.

Kit PCR itu sendiri mempunyai ketepatan diagnostik 100%.

PCR kuantitatif untuk hepatitis membolehkan anda menentukan viral load di badan pesakit. Dengan pertolongannya:

  • tahap penyakit ditentukan (akut, kronik);
  • keberkesanan rawatan antivirus ditentukan;
  • keperluan untuk biopsi hati ditentukan.

Dalam beberapa kes, pesakit tidak merasakan tanda-tanda penyakit ini, sementara kaedah PCR telah menunjukkan adanya jangkitan. Ini bermaksud bahawa penyakit ini berada pada tahap awal perkembangan atau dalam bentuk kronik. Untuk memperjelas diagnosis, kajian tambahan diperlukan, untuk permulaan awal rawatan antivirus.

Kos diagnostik PCR

Klinik kerajaan melakukan ujian darah untuk PCR secara percuma jika ada rujukan dari pakar penyakit berjangkit atau ahli hepatologi.

Perkhidmatan berbayar untuk diagnostik PCR disediakan di semua bandar utama Rusia. Kos bergantung kepada jenis ujian, peralatan yang ada, masa dan faktor lain.

  • Analisis PCR berkualiti tinggi di Moscow dan St Petersburg berharga 600 hingga 900 rubel. Di kawasan - dari 300 hingga 800 rubel.
  • Penentuan viral load hepatitis C akan menelan belanja 17,000-22,000 rubel. Untuk hepatitis B (B) harga kajian kuantitatif: 1200-10000 rubel.

Kelebihan dan kekurangan kaedah PCR

Apakah kelebihan kaedah tindak balas rantai polimerase berbanding kaedah diagnostik lain?

  1. Pelbagai aplikasi. Dengan PCR, menggunakan peralatan standard, anda dapat mengenal pasti sebarang virus.
  2. Ketepatan menentukan patogen. Dengan menggunakan pelbagai kombinasi enzim dan teknik pengujian, spesifikasi ujian 100% untuk jangkitan yang ditunjukkan dapat dicapai.
  3. Kepekaan tinggi. Teknik ini membolehkan anda mengesan kehadiran satu molekul virus dalam darah.
  4. Kecekapan. Analisis kualitatif siap dalam beberapa jam, analisis kuantitatif dalam dua hari.
  5. Diagnostik virus semasa tempoh inkubasi. Dengan PCR, patogen ditentukan bukan dengan adanya antibodi, ketika sudah ada tindak balas imun tubuh, tetapi sebelum bermulanya proses patologi, yang memudahkan rawatan.

Kelemahan analisis PCR adalah akibat daripada kelebihannya:

  • untuk kesucian analisis, tahap kemurnian tertinggi diperlukan, termasuk udara di makmal, sehingga DNA "asing" tidak masuk ke dalam sampel yang dikaji;
  • keperluan tinggi untuk kakitangan yang melakukan persampelan dan analisis biomaterial.

Penilaian hasil yang diperoleh harus dilakukan oleh doktor yang hadir, yang tahu bagaimana untuk memisahkan analisis yang benar dari yang positif yang salah (ketika rawatan telah selesai, tetapi virus yang tidak dapat bertahan tetap ada di dalam darah) dan negatif yang negatif (apabila virus tidak dikesan dalam gambar klinikal).

Analisis PCR untuk hepatitis C

Untuk membuat diagnosis hepatitis C virus kronik (CVHC), diperlukan pemeriksaan menyeluruh seseorang, yang merangkumi kajian klinikal, makmal dan instrumental. Dari sudut diagnostik, kaedah PCR - reaksi berantai polimerase penting untuk membuat diagnosis yang betul..

Apa yang ditunjukkan oleh analisis ini dan mengapa ia diperlukan?

Kaedah makmal ini mengesan RNA virus hepatitis C dalam darah manusia. Bersama dengan pemeriksaan imunosorben berkait enzim (ELISA) untuk antibodi terhadap virus, PCR digunakan untuk mendiagnosis CVHC dan genotip agen penyebabnya. Kajian ini adalah salah satu kaedah diagnostik makmal terkini. Kebolehpercayaannya dalam CVHC melebihi 97%, yang dianggap sebagai petunjuk yang sangat baik untuk penyelidikan.

Terdapat tiga ujian darah PCR untuk hepatitis C kronik: kualitatif, kuantitatif dan genotip virus. Kajian pertama (analisis kualitatif) untuk virus mengesannya dalam darah, oleh itu ia hanya digunakan untuk membuat diagnosis.

Kajian kedua (kuantitatif) menentukan tahap viral load pada tubuh, oleh itu ia digunakan untuk memantau keberkesanan terapi.

PCR ketiga (genotyping) menjelaskan diagnosis dengan menetapkan genotip virus, yang sangat penting untuk pelantikan rawatan antivirus yang betul.

Inti dari teknik tindak balas rantai polimerase adalah penggunaan enzim yang berulang kali menggandakan bahan genetik patogen dalam biomaterial. Dalam proses replikasi tersebut, tabung uji dengan darah dipanaskan dan disejukkan beberapa kali ke suhu yang diperlukan untuk mempercepat reaksi enzimatik. Hasil daripada manipulasi ini, jumlah genom virus meningkat berkali-kali, yang memungkinkan untuk mengesannya walaupun dengan jumlah minimum.

Diagnostik PCR mempunyai banyak kelebihan berbanding ujian makmal lain:

  • kepekaan tinggi - 97-98%;
  • kekhususan analitik yang dijamin (mengenal pasti patogen yang perlu dijumpai, dan bukan ketegangan yang berkaitan);
  • kepantasan melaksanakan (tidak lebih dari 2 hari untuk mendapatkan pendapat).

Tiga jenis analisis PCR

Analisis PCR berkualiti tinggi diresepkan untuk semua pesakit di mana antibodi terhadap virus CVHC dikesan oleh analisis ELISA. Setelah menjalankan PCR kualitatif, dua varian jawapan dapat diperoleh: "RNA dikesan" atau "RNA tidak dijumpai". Untuk mengesan jumlah minimum virus dalam darah, diperlukan sistem ujian dengan kepekaan sekurang-kurangnya 50 IU / ml. Sekiranya kepekatan virus dalam darah pesakit kurang daripada yang dapat ditentukan oleh diagnostik, maka hasil ujian mungkin palsu-negatif. Untuk mengelakkan kesalahan diagnostik seperti itu, makmal yang menjalankan diagnostik PCR mesti dilengkapi dengan sistem ujian yang sangat sensitif. Di makmal "Invitro", misalnya, ujian dengan kepekaan 15 IU / ml digunakan. Pekerja makmal wajib memberikan maklumat mengenai kepekaan ujian kepada pesakit dan doktor atas permintaan pertama mereka..

Analisis PCR kuantitatif menentukan tahap viremia, iaitu kepekatan patogen dalam darah, viral load. Hasil kajian ini, berbeza dengan PCR kualitatif, dinyatakan dalam jumlah, misalnya, 2 × 10 * 6 IU / ml, yang bermaksud 2 juta unit antarabangsa dalam 1 ml darah. Beberapa makmal menggunakan petunjuk yang berbeza - jumlah salinan / ml. Kedua-dua petunjuk ini mudah ditukar: 1 unit antarabangsa sama dengan 4 salinan RNA. Oleh itu, 2 × 10 * 6 IU / ml akan bermaksud bahawa 8 × 10 * 6 salinan RNA virus dalam 1 ml dijumpai di dalam darah pesakit, iaitu. 8 juta salinan dalam 1 ml darah.

Genotip adalah definisi salah satu daripada enam genotip virus. Gambaran klinikal, kadar perkembangan komplikasi dari hati dan prognosis untuk kehidupan masa depan pesakit bergantung pada genotip patogen. Genotip virus sangat penting sudah pada tahap diagnosis, kerana gabungan ubat-ubatan dan jangka masa kursus terapi yang akan diresepkan kepada pesakit bergantung pada definisi yang betul..

Walau bagaimanapun, walaupun kajian makmal yang kelihatan "ideal" mempunyai kekurangannya:

  • dalam kajian ini, berlaku replikasi bahan genetik semua patogen, bahkan yang mati, yang dapat memutarbelitkan hasilnya. Oleh itu, untuk mengawal keberkesanan menggunakan PCR, analisis berulang dilakukan tidak lebih awal dari 2 bulan setelah yang sebelumnya, sehingga virus yang mati mempunyai masa untuk "meninggalkan" tubuh pesakit;
  • sebahagian daripada genom virus, yang ditentukan menggunakan sistem ujian, secara teorinya boleh terdapat pada virus atau mikroorganisma lain, jadi ada kemungkinan tindak balas positif yang salah;
  • virus bermutasi dengan cepat. Kadang-kadang kelajuan dan tahap mutasi virus sangat tinggi sehingga sistem ujian berhenti menangkap genom mereka. Akibatnya, hasil negatif palsu mungkin..

Untuk mengatasi kekurangan ini, pengeluar sistem ujian makmal untuk diagnostik PCR sentiasa melakukan ujian mereka, termasuk untuk tindak balas silang dan kepekaan terhadap genotip virus tertentu..

Cara mengambil ujian PCR untuk hepatitis C?

Agar kesimpulan peperiksaan dengan kaedah PCR dapat dipercayai, perlu mengikuti peraturan untuk mempersiapkan pelaksanaannya dengan ketat:

  • kajian itu dilakukan semasa perut kosong (glukosa, lemak, mineral yang memasuki aliran darah dari makanan boleh mempengaruhi kelajuan dan kualiti reaksi enzimatik);
  • jurang antara pengambilan makanan terakhir dan pengambilan sampel darah untuk analisis mestilah sekurang-kurangnya 8 jam;
  • menjelang kajian, dilarang minum alkohol dan makan makanan berlemak, yang mana tempoh penghapusannya berlarutan;
  • sehari sebelum pergi ke makmal, tekanan fizikal dan emosi yang kuat harus dielakkan;
  • merokok tidak digalakkan sehingga pengambilan sampel darah.

Untuk mengelakkan kesimpulan yang salah, pesakit yang diduga perlu datang ke makmal sedikit lebih awal daripada pengambilan sampel darah. Perlu 15-20 minit untuk seseorang menarik nafas dan menenangkan diri. Adrenalin dalam darah setelah berjalan cepat boleh mempengaruhi keputusan ujian.

Sekiranya pesakit yang dihantar untuk analisis mengambil ubat, dia mesti memberitahu doktor mengenai perkara ini. Ada kemungkinan anda harus menolak untuk mengambil sebilangannya (jika boleh).

Hasil analisis PCR untuk hepatitis C

Penafsiran hasil dilakukan oleh pembantu makmal makmal yang melakukan analisis. Penyahkodan adalah definisi penyimpangan hasil dari norma. Norma indikator ditetapkan secara langsung oleh pengeluar sistem ujian, yang digunakan oleh makmal untuk diagnostik. Oleh itu, tidak mengejutkan bahawa di beberapa makmal viral load ditentukan dalam IU / ml, dan yang lain - dalam salinan / ml..

Setelah mendapat kesimpulan, anda harus dapat menafsirkannya dengan betul. Tafsiran keputusan ujian harus ditangani oleh doktor pesakit yang menderita hepatitis C. Hanya setelah pemeriksaan objektif, instrumental dan makmal pesakit, doktor dapat memperoleh sejumlah data yang cukup untuk interpretasi yang kompeten terhadap hasil PCR yang diperoleh..

Menilai analisis kualitatif umumnya mudah, bahkan untuk pesakit. Hanya ada satu hasil: "dijumpai" atau "tidak dijumpai". Lebih-lebih lagi, yang kedua adalah norma.

Analisis kuantitatif lebih sukar ditafsirkan. Ini menunjukkan tahap viral load pada pesakit. Walaupun di kalangan ahli hepatologi, tidak ada kata sepakat mengenai bagaimana menafsirkan viremia yang dikesan. Sebilangan besar doktor cenderung mempercayai bahawa beban melebihi 8 × 10 * 5 IU / ml harus dianggap tinggi. Beban yang sangat tinggi dianggap lebih daripada 1 × 10 * 7 IU / ml, dan beban rendah kurang dari 4 × 10 * 5 IU / ml..

Tahap viral load menunjukkan virulensi (keagresifan) virus: semakin banyak jumlahnya dalam darah, semakin cepat timbul komplikasi dari hati. Kepekatan virus yang tinggi dalam darah wanita hamil meningkatkan kemungkinan penembusannya melalui penghalang plasenta darah ke janin. Viremia juga mempengaruhi keberkesanan rawatan: dengan bilangan yang rendah, keberkesanan terapi lebih tinggi daripada yang tinggi.

Untuk memastikan kebolehpercayaan analisis PCR untuk hepatitis C, keutamaan hanya harus diberikan kepada makmal yang telah membuktikan diri mereka dengan baik. Pada masa yang sama, dasar harga tidak boleh memainkan peranan utama..